Решение по результатам налоговой проверки — Контур.Эксперт — СКБ Контур
Привлечение к ответственности
Рассмотрев материалы налоговой проверки и мероприятий дополнительного налогового контроля (когда они нужны), руководитель ИФНС (замруководителя) может привлечь компанию к ответственности за нарушение налогового законодательства (п. 7 ст. 101 НК РФ).
Но, прежде чем вынести решение, руководитель ИФНС должен выяснить, есть ли обстоятельства, которые исключают или смягчают вину компании или, наоборот, отягчают ее ответственность (п. 5 ст. 101 НК РФ).
Что указывается в документе
В решении о привлечении к ответственности указываются (п. 8 ст. 101 НК РФ):
- обстоятельства совершенного налогового правонарушения;
- доводы компании в свою защиту;
- результаты проверки этих доводов;
- решение о привлечении компании к налоговой ответственности с указанием соответствующих статей НК РФ;
- меры ответственности, которые будут приняты в отношении налогоплательщика;
- размер выявленной недоимки, пени и штрафа;
- срок, в течение которого можно обжаловать решение, а также порядок обжалования;
- наименование и адрес органа, в котором решение можно обжаловать.
В решении об отказе в привлечении к ответственности указываются обстоятельства, послужившие основанием для отказа. Также в таком решение могут быть указаны размер недоимки, выявленной в ходе проверки, и сумма пени (п. 8 ст. 101 НК РФ).
Оцените финансовое состояние вашего предприятия с помощью Контур.Эксперт
Отправить заявкуВручение решения
Решение должно быть вручено представителю организации в течение 5 рабочих дней после его принятия (п. 9 ст. 101 НК РФ). Если это не представляется возможным, то ИФНС направит решение заказным письмом. В этом случае будет считаться, что решение получено налогоплательщиком по прошествии 6 рабочих дней с даты отправки письма инспекцией (п. 13 ст. 101 НК РФ).
Вступление решения в силу
Вынесенное решение вступит в законную силу по истечении месяца со дня его вручения (п. 9 ст. 101 НК РФ).
Организация вправе обжаловать решение ИФНС, подав апелляционную жалобу. Есть три варианта развития событий.
- Вышестоящий налоговый орган не отменяет решение ИФНС. В этом случае оно вступает в силу со дня принятия соответствующего решения вышестоящим налоговым органом.
- Вышестоящий налоговый орган отменяет решение и выносит новое. Тогда оно вступает в силу со дня его принятия.
- Апелляционная жалоба остается без рассмотрения. В этой ситуации решение ИФНС вступит в силу со дня принятия вышестоящим налоговым органом решения об отклонении жалобы, но не ранее истечения срока ее подачи (ст. 101.2 НК РФ).
После вступления решения в силу в течение 20 рабочих дней в адрес компании будет направлено требование об уплате доначисленного налога (пени, штрафа) (п. 2 ст. 70 НК РФ).
Приложение N 9 / КонсультантПлюс
к приказу ФНС России
от 07.11.2018 N ММВ-7-2/628@
Форма поКНД1165010
Справка
о проведенной выездной налоговой проверке
________________
(дата)
Проверка назначена на основании Решения _______________________________
(наименование налогового
органа)
о проведении выездной налоговой проверки ______________________________ <1>
от _____________ N _______, с изменениями, внесенными __________________.
(дата) (реквизиты решения
(решений)
Лицо, в отношении которого проведена выездная налоговая проверка:
______________________________________________________________________ <2>.
(полное и сокращенное наименования организации или полное и сокращенное
наименования организации и филиала (представительства) организации,
Ф.И.О. <3> физического лица; ИНН, КПП <4>)
Предмет выездной налоговой проверки (вопросы правильности исчисления и
своевременности уплаты (удержания, перечисления) налогов, сборов, страховых
взносов) и период, за который проведена выездная налоговая проверка:
| Налог (сбор, страховые взносы) <5> | Проверяемый период с ____ по ____ | |
Лица, в отношении которых проведена выездная налоговая
проверка - участники консолидированной группы налогоплательщиков и
проверенные периоды <2>:
Полное и сокращенное наименования | Периоды, за которые проведена выездная налоговая проверка | |||
Ответственный участник консолидированной группы налогоплательщиков | ||||
Участник консолидированной группы налогоплательщиков: | ||||
Проверенный период _________________.
Предметом выездной налоговой проверки являлась правильность исчисления
и своевременность уплаты налога на прибыль организаций по консолидированной
группе налогоплательщиков.
Срок проведения выездной налоговой проверки продлевался на основании
Решения _______________________________ о продлении срока проведения
(наименование налогового
органа)
выездной налоговой проверки от _____________ N _______.
(дата)
Срок проведения выездной налоговой проверки приостанавливался на
основании Решения _______________________________ о приостановлении
(наименование налогового
органа)
проведения выездной налоговой проверки ________________ <1>
от _____________ N _______.
(дата)
Срок проведения выездной налоговой проверки возобновлялся на основании
Решения _______________________________ о возобновлении проведения выездной
(наименование налогового
органа)
налоговой проверки _____________________ <1> от _____________ N _______.
(дата)
Подпись должностного лица налогового
органа
____________________________________ _____________ ______________________
(должность, наименование налогового (подпись) (Ф.И.О. <3>)
органа)
Телефон: __________________________
Справку о проведенной выездной налоговой проверке получил _____________
_____________________________________________________________________ <6>.
(дата, подпись, Ф.И.О. <3> лица, получившего документ;
для представителя указывается основание представительства
(наименование и иные реквизиты документа, подтверждающего
полномочия представителя)
———————————
Если проверка назначена на основании статьи 89.1 Налогового кодекса Российской Федерации, указывается «консолидированной группы налогоплательщиков».<2> Нужное указать.
<4> КПП указывается для организаций.
<3> Отчество указывается при наличии.
В качестве предмета выездной налоговой проверки может быть указано «По всем налогам, сборам, страховым взносам». Согласно пункту 1 статьи 89.2 Кодекса в случае проведения выездной налоговой проверки по налогу на прибыль организаций налогоплательщика — участника регионального инвестиционного проекта дополнительно указывается «Соответствие показателей реализации регионального инвестиционного проекта требованиям, предъявляемым к региональным инвестиционным проектам и (или) их участникам, установленным Кодексом и (или) законами соответствующих субъектов Российской Федерации. При проведении выездной налоговой проверки за период, за который проводился налоговый мониторинг, дополнительно указывается «Правильность исчисления и своевременность уплаты налогов, сборов, страховых взносов в соответствии с мотивированным мнением (дата, номер) налогового органа.».<6> Заполняется в случае вручения документа на бумажном носителе.
Моратории ИФНС на налоговые проверки во время пандемии коронавируса 2020
Что значит мораторий на проверки ИФНС
- до 1 мая 2020 года – Приказом ФНС № ЕД-7-2/181 от 20.03.2020;
- до 31 мая 2020 года – п. 4 Постановления Правительства РФ № 409 от 02.04 2020.
Мораторий распространяется на всех налогоплательщиков. Цель – поддержать бизнес, который находится в сложных экономических условиях.
Мораторий касается и запланированных контрольных мероприятий и тех, которые уже в процессе проведения. Если дата рассмотрения материалов налоговой проверки выпала на период до 31.05.2020 (включительно), то инспекторы должны письменно сообщить налогоплательщику о переносе срока.
Незавершенные проверки по применению контрольно-кассовой техники и соблюдению валютного законодательства налоговики должны закончить дистанционно – через каналы спецсвязи, личный кабинет налогоплательщика или по почте.
Какие налоговые проверки приостановлены
ФНС в письме № СД-4-2/5985@ от 09.04.2020 сообщила, что до 31.05.2020 (включительно) инспекторы не будут:
- выносить решения о выездных налоговых проверках, в том числе повторных;
- проводить уже назначенные выездные (включая повторные) налоговые проверки.
До той же даты приостановлены сроки, связанные с выездными проверками и налоговыми правонарушениями (ст. 100, 101 и 101.4 НК РФ). Течение этих сроков возобновляется в июне. Например, если в апреле-мае налоговики направят налогоплательщику акт по результатам проведенной ранее проверки, то срок, отведенный на подачу возражений, будет отсчитываться только с 01.06.2020.
Также до 31.05.2020 отменили и другие мероприятия по контролю, при которых инспекторы лично общаются с налогоплательщиками:
- допросы;
- осмотры;
- выемки документов;
- инвентаризации;
- вызовы в налоговую инспекцию.
Моратории на проверки малого и среднего бизнеса
Условие действия такого моратория – организация или ИП должны относиться к малому или среднему предпринимательству. Узнать, к какой категории относится бизнес, можно через онлайн-сервис ФНС «Единый реестр субъектов МСП». Для этого нужно ввести ИНН или ОГРН (ОГРНИП), либо наименование организации (ФИО ИП).
Если вы не нашли себя в базе субъектов МСП и считаете, что это ошибочно, в сервисе есть возможность отправить заявку на проверку сведений Реестра.
Итоги
До 31.05.2020 для всех организаций и предпринимателей отменили выездные налоговые проверки.
У малого и среднего бизнеса до конца 2020 года не будет и других проверок, кроме налоговых. Проведут их лишь в исключительных случаях, например, при угрозах здоровью и жизни граждан или в чрезвычайной ситуации.
Спокойно пережить один из самых непростых периодов бизнеса поможет онлайн-сервис «Моё дело». Эксперты сервиса в курсе последних изменений – они всегда готовы ответить на вопросы и помогут вам не допустить ошибок.
Онлайн проверка налоговой отчетности (ФНС, иФНС)
30.06.2021
Реализованы изменения формы и формата представления «Сведений о трудовой деятельности зарегистрированного лица (СЗВ-ТД)» в соответствии с Постановлением Правления ПФР от 27.10.2020 № 769п
30.06.2021
Реализованы изменения форм Счет-фактура и УПД в соответствии с Постановлением Правительства РФ от 02.04.2021 № 534
30.06.2021
21.04.2021
Обновлён Формат представления отчетности ОФР (номер версии формата RU:5.04)
02.04.2021
Новая декларация по ЕСХН. Приказ № ЕД-7-3/926@ вступил в силу 29.03.2021
29.03.2021
Функционал «Многобазовые операции 6-НДФЛ» приведен в соответствие новому формату 5.01 (для отчетности начиная с 1 кв. 2021 года)
При печати справок о доходах (2-НДФЛ) в том числе за 2021 год открыта кнопка «Реестр» как для справки одному получателю, так и для всех получателей (в связи с большой популярностью реестра)
18.03.2021
Реализована новая форма декларации по налогу на имущество организаций. Приказ ФНС России от 09.12.2020 № КЧ-7-21/889@.
25.02.2021
Добавлено новое сообщение в ФНС «Сообщение о наличии у налогоплательщика-организации транспортных средств и (или) земельных участков, признаваемых объектами налогообложения по соответствующим налогам».
05.02.2021
Добавлена статистическая форма «Сведения о деятельности индивидуального предпринимателя за 2020 год» (№ 1-предприниматель)
20.01.2021
Добавлена статистическая форма «Сведения о численности и заработной плате» № 1-Т с возможностью вывода на печать
14.01.2021
Реализована возможность заполнения данных из доходов для формы 6-НДФЛ за 2021 отчетный год
11.01.2021
Расчет больничных, приходящихся на 2021-й год, производится в соответствии со статьей 4 Федерального закона от 29.12.2020 № 478-ФЗ
Проверка ФН и ККТ на наличие внесения в реестр в ФНС
Чтобы проверить, что фискальный накопитель внесен в реестр ФНС рекомендуем:
1. Перейти на сайт налоговой по проверке ФН https://kkt-online.nalog.ru/
2. Выбрать модель фискального накопителя(модель ФН указывается в паспорте ФН)
3.Ввести заводской номер фискального накопителя. Заводской номер фискального накопителя можно взять из следующих источников:
- Заводской номер фискального накопителя указан на паспорте ФН
- Заводской номер фискального накопителя печатается на чеке
- Заводской номер фискального накопителя отображается на смарт-терминале в разделе «Настройки-Обслуживание кассы»
- Заводской номер фискального накопителя указан на этикетке, которая наклеена на паспорт смарт-терминала
Положительным результатом является ответ системы «ФН включен в реестр, не зарегистрирован в налоговых органах».
Если получен следующий ответ «ФН не включен в реестр, не зарегистрирован в налоговых органах», то следует:
- Сверить заводской номер ФН в паспорте ФН и на смарт-терминале в разделе «Настройки-Обслуживание кассы»
- Если номер ФН совпадает, то следует направить обращение в поддержку с приложенным фото паспорта ФН и фото из раздела «Настройки-Обслуживание кассы»
Чтобы проверить, что ККТ внесена в реестр ФНС нужно:
1. Перейти на сайт налоговой по проверке ККТ: https://kkt-online.nalog.ru/
2. Выбрать модель ККТ(модель указана в паспорте смарт-терминала)
- Модель 7.2 в реестре называется СТ2Ф
- Модель 7.3 в реестре называется СТ3Ф
- Модель 5 в реестре называется СТ5Ф
3. Ввести заводской номер ККТ
4. Нажать на кнопку «Проверить»
Положительным результатом является ответ системы «ККТ включена в реестр, не зарегистрирована в налоговых органах».
Если получен следующий ответ «ККТ не включена в реестр, не зарегистрирована в налоговых органах», то следует:
- Сверить заводской номер ККТ в паспорте и на смарт-терминале в разделе «Настройки-Обслуживание кассы»
- Если номер ККТ совпадает, то следует направить обращение в поддержку с приложенным фото паспорта и фото из раздела «Настройки-Обслуживание кассы»
ФНС обновила среднеотраслевые показатели для планирования налоговых проверок
Александр Труханов, бухгалтер-консультант GenplaceВ последнее время налоговые органы осуществляют подход к организации контрольной работы в соответствии с концепцией планирования выездных налоговых проверок (ВНП), утвержденной приказом ФНС России от 30.05.2007 № ММ-3-06/333@. Критерии отбора налогоплательщиков на проведение выездной налоговой проверки носят открытый характер. Расскажу как с их помощью максимально обезопаситься от ВНП.
Список общедоступных критериев для самостоятельной оценки рисков, используемых налоговыми органами при отборе налогоплательщиков для проведения ВНП, приведен в Приложении №2 к приказу ФНС России от 30.05.2007 №ММ-3-06/333@. Помимо соблюдения уровня МРОТ при выплате сотрудникам зарплаты и проверки контрагентов на добросовестность, необходимо ориентироваться на отраслевые показатели налоговой нагрузки и рентабельности.
На днях ФНС утверждены средние показатели налоговой нагрузки и рентабельности за 2018 г., Данные размещены на официальном сайте налоговой службы. Если ваши показатели отклоняются от средних величин в меньшую сторону, есть риск включения в план проведения ВНП.
Налоговая нагрузка
Расчет налоговой нагрузки позволяет контролировать уровень фискального обременения по действующим налогам. Размер фискального обременения — это отношение суммы налогов компании к сумме полученной выручки, определенной по данным бухгалтерского учета за отчетный период.
Рассчитать налоговую нагрузку можно с помощью официального калькулятора ФНС
Для корректного расчета показателя следует учитывать рекомендации, закрепленные в Письмах Минфина от 11.01.2017 № 03-01-15/208, ФНС от 22.03.2013 № ЕД-3-3/1026@.
- В расчет включайте все суммы фискальных платежей, которые были начислены налогоплательщиком в отчетном периоде.
- Учтите платежи, которые компания уплачивает в качестве налогового агента. Например, НДФЛ по работникам также включайте в расчетные данные.
- Исключите суммы ввозного НДС.
- Не учитывайте таможенные пошлины, уплачиваемые по действующему законодательству.
- Не включайте в расчет суммы начисленных страховых взносов.
Полученный результат необходимо сравнить с отраслевыми показателями по данным налоговой службы. Если данные налоговой нагрузки, полученные вами, меньше среднеотраслевых, есть опасения попасть в список на проведение ВНП или получить приглашение на комиссию по легализации.
Если Ваш вид деятельности в таблицах ФНС не поименован, необходимо сравнить налоговую нагрузку со средней по России. За 2018 год она составила 11%.
Рентабельность
Налоговые органы интересуют два показателя рентабельности:
— рентабельность активов по видам экономической деятельности;
— рентабельность продаж товаров / продукции / работ / услуг.
Рассчитать рентабельность можно с помощью нашего калькулятора или по следующим формулам:
— Рентабельность активов:
Рентабельность активов
= Стр. 2300 «Прибыль (убыток) до налогообложения» отчета о финансовых результатах
/ Стр. 1600 «БАЛАНС (актив)» годового баланса
* 100%
— Рентабельность продаж:
Рентабельность продаж
= Стр. 2200 «Прибыль (убыток) от продаж» отчета о финансовых /результатах
/ Стр. 2120 «Себестоимость продаж» + Стр. 2210 «Коммерческие расходы» + Стр. 2220 «Управленческие расходы» отчета о финансовых результатах
* 100%
Полученные цифры также необходимо сравнить с данными ФНС.
Если он меньше хотя бы на 10% последствия будут те же, что и при недостаточной налоговой нагрузке.
Конечно, придерживаясь общедоступных критериев оценки рисков и среднеотраслевых показателей налоговой нагрузки и рентабельности, вы не исключите риск проведения выездной налоговой проверки на 100% Но эти меры помогут максимально снизить привлечения внимания со стороны налоговых органов.
Узнать адрес налоговой, график работы налоговой, телефоны ИФНС, код ИФНС, платежные реквизиты ИФНС, узнать ИФНС по адресу, определение реквизитов ИФНС.
Данная статья поможет узнать ИФНС по адресу регистрации, если Вы не знаете где находится Ваша налоговая инспекция;
Узнать код ИФНС, если Вы заполняете форму, но не знаете код налогового органа;
Узнать название налоговой, если Вы пишите заявление, но не знаете полное наименование Вашей ИФНС;
Получить реквизиты Вашей налоговой, если хотите заплатить налоги, но не знаете платёжные реквизиты ИФНС;
Узнать контактные номера ИФНС, если хотите позвонить в свою налоговую инспекцию, но не знаете номер телефона;
Узнать график работы ИФНС, если хотите посетить налоговую, но не знаете дни и часы работы Вашей ИФНС.
Внимание! Если реквизиты необходимы Вам для оплаты госпошлины, воспользуйтесь сервисом ФНС по уплате госпошлины.
Определение реквизитов ИФНС
Для поиска информации о территориальной налоговой инспекции, воспользуйтесь сервисом «Определение реквизитов ИФНС», который позволяет узнать:
— Код ИФНС
— Адрес ИФНС
— Платёжные реквизиты ИФНС
— Полное наименование ИФНС
— Контактные телефоны ИФНС
— Режим работы ИФНС
Как пользоваться сервисом «Определение реквизитов ИФНС»
Чтобы получить реквизиты ИФНС, перейдите по ссылке на сервис «Определение реквизитов ИФНС». В открывшемся окне появится форма запроса, в которой нужно ввести:
1. Код ИФНС. Если не знаете код налоговой инспекции, то пропустите данный шаг, нажав кнопку «Далее»;
2. Регион. Выберите из выпадающего списка Ваш регион;
3. Район. Если Вы не знаете Ваш район или его попросту нет, то пропустите данный шаг, нажав кнопку «Далее»;
4. Город. Выберите из выпадающего списка Ваш город;
5. В немногих случаях потребуется указать населенный пункт и улицу.
После успешного заполнения формы сервис выдаст таблицу с полной информацией о налоговом органе по Вашему адресу.
Аутоантител против интерферонов I типа у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Аутоантитела к IFN типа I у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Автор: Пол Бастард, Линдси Б. Розен, Цянь Чжан, Элефтериос Михайлидис, Ханс-Генрих Хоффманн, Ю Чжан, Карим Доргам, Квентин Филиппот, Джереми Розаин, Вивьен Безиат, Джереми Лери, Элана Шав, Лийз Хальясмаро, Лийз Хальясмаро , Люси Бизьен, Софи Труйе-Ассан, Керри Доббс, Адриана Алмейда де Хесус, Александр Бело, Анн Калласте, Эмили Катерино, Ясин Танджауи-Ламбьотт, Джереми Ле Пен, Гаспар Кернер, Бенедетта Биджо, Йоанн Зелеангнер, Йоанри Йоанн Зелеангнер Андраш Н.Спаан, Оттавия М. Делмонте, Майкл С. Аберс, Алессандро Айути, Джорджио Касари, Вито Лампасона, Лоренцо Пьемонти, Фабио Чичери, Кая Бильгувар, Ричард П. Лифтон, Марк Вассе, Давид М. Смаджа, Мелани Мигамин, Жером Хаджадж, Бенедикт Терьер, Дарраг Даффи, Луис Кинтана-Мурси, Дидерик ван де Бик, Люси Руссель, Дональд Винь, Стюарт Г. Танжье, Филомин Херинк, Дэвид Далмау, Хавьер Мартинес-Пикадо, Петтер Броден, Мишель К. Нуссенцвейг, Стефани Бодени Дюпюи, Карлос Родригес-Гальего, Гийом Фогт, Трине Х.Могенсен, Эндрю Дж. Олер, Джингвен Гу, Питер Д. Бурбело, Джеффри И. Коэн, Андреа Бионди, Лаура Рэйчел Беттини, Мариэлла Д’Анджио, Паоло Бонфанти, Патрик Россиньоль, Жюльен Майо, Фредерик Риё-Локат, Эйстейн С. Хусебай , Франческа Фуско, Матильда Валерия Урсини, Луиза Имберти, Алессандра Соттини, Симоне Пагера, Юджиния Кирос-Ролдан, Камилло Росси, Риккардо Кастаньоли, Даниэла Монтанья, Амелия Ликари, Джан Луиджи Марселья, Ксавье Дюваль, Джейд-Госе Группа иммунного ответа на COVID, клиницисты COVID, клиницисты COVID-STORM, Imagine COVID Group, французская группа когортных исследований COVID, The Milieu Intérieur Consortium, CoV-Contact Cohort, Amsterdam UMC Covid-19 Biobank, COVID Human Genetic Effort, John S.Цанг, Рафаэла Гольдбах-Мански, Кай Кисанд, Михаил С. Лионакис, Энн Пуэль, Шен-Ин Чжан, Стивен М. Холланд, Гай Горохов, Эммануэль Жуанги, Чарльз М. Райс, Орели Кобат, Луиджи Д. Нотаранджело, Лоран Абель, Хелен С. Су, Жан-Лоран Казанова
Наука
Аутоантител к IFN типа I у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Аутоантитела к IFNs типа I у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Пол Бастард, Линдси Б.Розен, Цянь Чжан, Элефтериос Михайлидис, Ханс-Генрих Хоффманн, Ю Чжан, Карим Доргам, Квентин Филиппо, Жереми Розен, Вивьен Безиа, Джереми Манри, Элана Шоу, Лийс Хальясмяги, Пярт Петерсон, Лазаро Лоренцо, Люси Бизьен, Софи Труйе-Ассан, Керри Доббс, Адриана Алмейда де Хесус, Александр Бело, Энн Калласте, Эмили Катерино, Ясин Танджауи-Ламбьотт, Жереми Ле Пен, Гаспар Кернер, Бенедетта Бигио, Йоанн Зелеутнер, Руи Ян, Александр Больце, Андраш Н.Спаан, Оттавия М. Делмонте, Майкл С. Аберс, Алессандро Айути, Джорджио Касари, Вито Лампасона, Лоренцо Пьемонти, Фабио Чичери, Кая Бильгувар, Ричард П. Лифтон, Марк Вассе, Дэвид М. Смаджа, Мелани Миго, Жером Хаджадж, Бенджамин Терьер, Дарра Даффи, Луис Кинтана-Мурси, Дидерик ван де Бик, Люси Руссель, Дональд Винь, Стюарт Дж. Танье, Филомин Хэринк, Дэвид Далмау, Хавьер Мартинес-Пикадо, Петтер Броден, Мишель К. Нуссенцвейг, Стефани Буассон-Дюпюи, Карлос Родригес-Гальего, Гийом Фогт, Трина Х.Могенсен, Эндрю Дж. Олер, Джингвен Гу, Питер Д. Бурбело, Джеффри Коэн, Андреа Бионди, Лаура Рэйчел Беттини, Мариэлла Д’Анджио, Паоло Бонфанти, Патрик Россиньоль, Жюльен Майо, Фредерик Рье-Локат, Эйстейн С. Хусебай, Франческа Фуско, Матильда Валерия Урсини, Луиза Имберти, Алессандра Соттини, Симоне Пагера, Эухения Кирос-Ролдан, Камилло Росси, Риккардо Кастаньоли, Даниэла Монтанья, Амелия Ликари, Джан Луиджи Марселья, Ксавье Дюваль, Джейд Гон, HGID Lab, NIAID-USUHS Immune Ответ на COVID Group, COVID клиницисты, COVID-STORM клиницисты, Imagine COVID Группа, Французская группа исследования COVID, Консорциум внутренней среды, CoV-Contact Cohort, Амстердамский биобанк UMC Covid-19, COVID Human Genetic Effort, John S.Цанг, Рафаэла Гольдбах-Мански, Кай Кисанд, Михаил С. Лионакис, Энн Пуэль, Шен-Ин Чжан, Стивен М. Холланд, Гай Горохов, Эммануэль Жуанги, Чарльз М. Райс, Орели Кобат, Луиджи Д. Нотаранджело, Лоран Абель, Хелен С. Су, Жан-Лоран Казанова
Аутоантитела к IFN типа I у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Аутоантитела к IFN типа I у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Пол Бастард, Линдси Б.Розен, Цянь Чжан, Элефтериос Михайлидис, Ханс-Генрих Хоффманн, Ю Чжан, Карим Доргам, Квентин Филипбот, Джереми Розейн, Вивьен Безиат, Джереми Манри, Элана Шоу, Лийс Хальясмэги, Пярт Петерсон, Софи Ласаро Ласаро Ласаро Ласаро Ласаро Ласаро Ласаро , Керри Доббс, Адриана Алмейда де Хесус, Александр Бело, Энн Калласте, Эмили Катерино, Ясин Танджауи-Ламбьотт, Джереми Ле Пен, Гаспар Кернер, Бенедетта Биджо, Йоанн Зелеутнер, Руи Ян, Александр Больце, Орас Н. Спаан Дельмонте, Майкл С.Аберс, Алессандро Айути, Джорджио Касари, Вито Лампасона, Лоренцо Пьемонти, Фабио Чичери, Кая Бильгувар, Ричард П. Лифтон, Марк Вассе, Дэвид М. Смаджа, Мелани Миго, Жером Хаджадж, Бенджамин Терьер, Дарраси Даффинти, Ллухам Дидерик ван де Бик, Люси Руссель, Дональд Винь, Стюарт Дж. Танье, Филомин Хэринк, Дэвид Далмау, Хавьер Мартинес-Пикадо, Петтер Броден, Мишель К. Нуссенцвейг, Стефани Буассон-Дюпюи, Карлос Родригес-Гальмелего, Карлос Родригес-Гальмелего, Трина Х. Могенсен, Эндрю Дж.Олер, Джингвен Гу, Питер Д. Бурбело, Джеффри И. Коэн, Андреа Бионди, Лаура Рэйчел Беттини, Мариэлла Д’Анджио, Паоло Бонфанти, Патрик Россиньоль, Жюльен Майо, Фредерик Риё-Локат, Эйстейн С. Хусебай, Франческа Фуско, Матильдэуско Валерия Урсини, Луиза Имберти, Алессандра Соттини, Симоне Пагера, Евгения Кирос-Ролдан, Камилло Росси, Риккардо Кастаньоли, Даниэла Монтанья, Амелия Ликари, Джан Луиджи Марселья, Ксавье Дюваль, Джейд Госн, HGID Labse, NIAID-Group Immune , COVID-клиницисты, COVID-STORM клиницисты, Imagine COVID Group, Французская группа когортных исследований COVID, The Milieu Intérieur Consortium, CoV-Contact Cohort, Amsterdam UMC Covid-19 Biobank, COVID Human Genetic Effort, John S.Цанг, Рафаэла Гольдбах-Мански, Кай Кисанд, Михаил С. Лионакис, Энн Пуэль, Шен-Ин Чжан, Стивен М. Холланд, Гай Горохов, Эммануэль Жуанги, Чарльз М. Райс, Орели Кобат, Луиджи Д. Нотаранджело, Лоран Абель, Хелен С. Су, Жан-Лоран Казанова
Наука
Врожденные ошибки IFN-иммунитета I типа у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Врожденные ошибки IFN-иммунитета I типа у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Цянь Чжан, Пол Бастард, Чжиюн Лю, Жереми Ле Пен, Марсела Монкада-Велес, Цзе Чен, Масато Огиси, Ира К.Д. Сабли, Стефани Ходейб, Сесилия Король, Жереми Розен, Кая Бильгувар, Цзюньцян Е, Александр Бользе, Бенедетта Бигио, Руи Ян, Андрес Аугусто Ариас, Циньхуа Чжоу, Ю Чжан, Фанни Оноди, Сарантис Корниотис, Леа Карпф, Квентин Филиппот, Марва Чбихи, Люси Боннет-Мадин, Карим Доргам, Никайя Смит, Уильям М. Шнайдер, Брэндон С. Разуки, Ханс-Генрих Хоффманн, Элефтериос Михайлидис, Лин Моенс, Джи Ын Хан, Лазаро Лоренцо, Люси Бизьен, Филип Мид, Анна-Лена Нихус, Эйлин Камилла Угурбиль, Орелиен Корно, Гаспар Кернер, Пэн Чжан, Франк Рапапорт, Йоанн Зелеутнер, Джереми Манри, Сесиль Массон, Йоханн Шмитт, Агата Шлютер, Том Ле Войер, Таушиф Хан, Хуан Ли, Жак Феллай, Люси Руссель, Мохаммад Шахруэй, Мохаммед Ф.Алосайми, Давуд Мансури, Хайя аль-Сауд, Фахд аль-Мулла, Ферас Альмурфи, Салех Заид Аль-Мухсен, Фахад Альшиме, Саид Аль Турки, Рана Хасанато, Дидерик ван де Бик, Андреа Бионди, Лаура Рашель Беттини, Мариэлла Д’Анджио, Паоло Бонфанти, Луиза Имберти, Алессандра Соттини, Симоне Пагера, Евгения Кирос-Ролдан, Камилло Росси, Эндрю Дж. Олер, Миранда Ф. Томпкинс, Камилла Альба, Изабель Вандернут, Жан-Кристоф Гоффар, Гийом Смитс, Изабель Мигеотт, Филомин Хэринк, Пере Солер-Паласин, Андреа Мартин-Налда, Роджер Колобран, Пьер-Эммануэль Моранж, Севги Келес, Фатьма Чёлкесен, Тайфун Озчелик, Кадрие Карт Ясар, Севтап Сеноглу, Чемси Нур Карабела, Карлос Родригес Гальего, Джузеппе Новелли, Сами Грайех, Ясин Танджауи-Ламбьотт, Ксавье Дюваль, Седрик Лауэнан, клиницисты COVID-STORM, клиницисты COVID, Imagine COVID Group, Французская группа когортных исследований COVID, CoV-Contact Cohort, Амстердам, UMC Биобанк Covid-19, COVID Human Genetic Effort, NIAID-USUHS / TAGC Группа иммунитета к COVID, Эндрю Л.Сноу, Клифтон Л. Далгард, Джошуа Милнер, Дональд Винь, Трина Х. Могенсен, Нико Марр, Андраш Н. Спаан, Бертран Буассон, Стефани Буассон-Дюпюи, Хасинта Бустаманте, Энн Пуэль, Майкл Чианканелли, Изабель Мейтс, Том Маниатис, Васили Сумелис, Али Амара, Мишель Нуссенцвейг, Адольфо Гарсия-Састре, Флориан Краммер, Аврора Пужол, Дарра Даффи, Ричард Лифтон, Шен-Ин Чжан, Гай Горохов, Вивьен Безиа, Эммануэль Жуанги, Ванесса Санчо-Симидзу, Чарльз М.Райс, Лоран Абель, Луиджи Д. Нотаранджело, Орели Кобат, Хелен С. Су, Жан-Лоран Казанова
Материалы / методы, дополнительный текст, таблицы, рисунки и / или ссылки
- Загрузить приложение
- Материалы и методы
- Рис. S1 — S11
- Таблицы S1 и S2
- Ссылки
- Контрольный список воспроизводимости MDAR
- Корректировка (22 октября 2020 г.): В предыдущей версии дополнительных материалов мы писали, что протестировали 113 из 118 вариантов обнаружены у пациентов с опасным для жизни COVID-19.У нас есть теперь добавлены данные по оставшимся пяти вариантам и соответственно скорректированы цифры.
- Оригинальная версия доступна здесь.
Врожденные пороки иммунитета к IFN I типа у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Врожденные пороки иммунитета к IFN I типа у пациентов с опасным для жизни COVID-19
Цянь Чжан, Пол Бастард, Чжиюн Лю, Жереми Ле Пен, Марсела Монкада-Велес, Цзе Чен, Масато Огиши, Ира К.Д. Сабли, Стефани Ходейб, Сесилия Король, Жереми Розен, Кая Бильгувар, Цзюньцян Е, Александр Больз, Бенедетта Бигио, Руи Ян, Андрес Аугусто Ариас, Циньхуа Чжоу, Ю Чжан, Фанни Оноди, Сарантис Корниотпис, Леа Марва Чбихи, Люси Боннет-Мадин, Карим Доргам, Никайя Смит, Уильям М. Шнайдер, Брэндон С. Разуки, Ханс-Генрих Хоффманн, Элефтериос Михайлидис, Лин Моенс, Джи Юн Хан, Лазаро Лоренцо, Люси Бизьен, Филип Мид, Анна- Лена Нихус, Эйлин Камилла Угурбиль, Орелиен Корно, Гаспар Кернер, Пэн Чжан, Франк Рапапорт, Йоанн Зелеутнер, Джереми Манри, Сесиль Массон, Йоханн Шмитт, Агата Шлютер, Том Ле Войер, Таушиф Хан, Хуан Ли, Жакан Мохаммад Шахруэй, Мохаммед Ф.Алосайми, Давуд Мансури, Хайя Аль-Сауд, Фахд Аль-Мулла, Ферас Альмурфи, Салех Заид Аль-Мухсен, Фахад Альшиме, Саид Аль Турки, Рана Хасанато, Дидерик ван де Бик, Андреа Бионди, Лаура Рахель Д’Анджелла, Мариоэлла ‘, Паоло Бонфанти, Луиза Имберти, Алессандра Соттини, Симона Пагера, Юджиния Кирос-Ролдан, Камилло Росси, Эндрю Дж. Олер, Миранда Ф. Томпкинс, Камилла Альба, Изабель Вандернот, Жан-Кристоф Гоффар, Гийом Филлидж, Изабель Менидж Херинк, Пер Солер-Паласин, Андреа Мартин-Налда, Роджер Колобран, Пьер-Эммануэль Моранж, Севги Келес, Фатма Тёлькесен, Тайфун Озчелик, Кадрие Карт Ясар, Севтап Сеноглу, Шемси Нур Карабелау, Карлос-Гальперагес, Ги́лос-Гальперагес, Ги́лос-Гальперагуэс , Ясин Танджауи-Ламбиотт, Ксавье Дюваль, Седрик Лауэнан, клиницисты COVID-STORM, клиницисты COVID, Imagine COVID Group, Французская группа когортных исследований COVID, CoV-Contact Cohort, Амстердам UMC Биобанк Covid-19, COVID Human Genetic Effort-USUHS / TAGC COVID Immunity Group, Эндрю Л. .Сноу, Клифтон Л. Далгард, Джошуа Д. Милнер, Дональд Винь, Трине Х. Могенсен, Нико Марр, Андраш Н. Спаан, Бертран Буассон, Стефани Буассон-Дюпюи, Хасинта Бустаманте, Анн Пуэль, Майкл Дж. Чианканелли, Изабель Мейтс, Том Маниатис, Василий Сумелис, Али Амара, Мишель Нуссенцвейг, Адольфо Гарсиа-Састре, Флориан Краммер, Аврора Пухоль, Дарраг Даффи, Ричард П. Лифтон, Шен-Ин Чжан, Гай Горохов, Вивьен Безиат, Эммануэль Джоуи Симидзу, Чарльз М. Райс, Лоран Абель, Луиджи Д.Нотаранджело, Орели Кобат, Хелен С. Су, Жан-Лоран Казанова
Наука
СигнализацияIfn в нейтрофилах | Энциклопедия
1. Распознавание вирусных PAMP нейтрофилами
Рисунок 1. Воспалительные реакции, вызванные вирусом. Распознавание вирусных патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (PAMP) врожденными клетками иммунной системы приводит к воспалительным ответам.Активация врожденных лейкоцитов через рецепторы распознавания образов (PRR), которые распознают вирусные PAMP в различных клеточных компартментах, вызывает ряд внутриклеточных сигнальных каскадов, опосредованных различными взаимосвязанными адапторными белками. Это приводит к опосредованной интерфероновым регуляторным фактором (IRF) активации интерферонов (IFN) и генов, стимулированных интерфероном (ISG), а также индукции, опосредованной ядерным фактором каппа-легкой цепи-энхансера активированных B-клеток (NF-κB). воспалительных цитокинов и хемокинов.Кроме того, восприятие вирусных PAMPs с помощью домена пирина семейства NOD-подобных рецепторов, содержащего 3 (NLRP3), гена I, индуцируемого ретиноевой кислотой (RIG-I), отсутствующего в 2-подобных рецепторах меланомы (AIM2), и / или IFN-индуцируемого белка 16 (IFI16) потенцирует образование комплексов инфламмасом, что в конечном итоге приводит к индукции воспалительных цитокинов, таких как интерлейкин (IL) -1β и IL-18. Другие сокращения: cGAMP: циклический гуанозинмонофосфат – аденозинмонофосфат, cGAS: циклический гуанозинмонофосфат – аденозинмонофосфатсинтаза, DAI: дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК) -зависимый активатор регуляторных факторов интерферона, ISRE: двухцепочечный ERP: двухцепочечный ER интерферон-чувствительный ответный элемент, MAVS: митохондриальный противовирусный сигнальный белок, MDA5: белок 5, связанный с дифференцировкой меланомы, MyD88: первичный ответ дифференцировки миелоида 88, NOD: нуклеотид-связывающий домен олигомеризации, PKR: протеинкиназа R, pol: полимераза, РНК: рибонуклеиновая кислота, ss: одноцепочечный, STING: стимулятор генов интерферона, TIRAP: адаптерный белок, содержащий домен рецептора Toll / интерлейкина-1 (TIR), TLR: toll-подобный рецептор, TRAF: фактор, связанный с рецептором фактора некроза опухоли, TRAM: адаптерная молекула, связанная с IFN-β (TRIF), содержащая TIR-домен.
Нейтрофилы экспрессируют широкий репертуар PRR и отвечают на лигирование PRR во время вирусной инфекции и воспаления. Нейтрофилы экспрессируют все TLR, за исключением TLR3 [5] . Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), который контролирует различные функции клеток при воспалении, может способствовать выживанию и перемещению нейтрофилов; он также может активировать окислительный взрыв, фагоцитоз и образование внеклеточных ловушек [6] и увеличивать экспрессию как TLR2, так и TLR9 в нейтрофилах [5] .Было показано, что TLR4, который распознает липополисахарид (LPS), необходим для миграции нейтрофилов в легкие [7] . Нейтрофилы часто попадают в легкие после ряда вирусных инфекций, в том числе вызванных респираторно-синцитиальным вирусом (RSV), высокопатогенным вирусом птичьего гриппа, вирусом гриппа A (IAV) [1] и вирусом везикулярного стоматита (VSV) [8] . Однако нейтрофилы все еще способны убивать ряд патогенов независимо от TLR [9] .Например, было показано, что полученный из нейтрофилов IFN-γ необходим для TLR-независимой защиты хозяина от внутриклеточных патогенов [10] . Были проведены исследования взаимодействия вирусов с TLR нейтрофилов [11] . Нейтрофилы быстро повышали экспрессию TLR2 после воздействия IAV [12] , а нейтрофилы, обработанные IAV, увеличивали их способность фагоцитировать другие патогены. Рецепторы распознавания одноцепочечной РНК, TLR7 и TLR8, также участвовали в реакции нейтрофилов на IAV [13] .Передача сигнала TLR4 в нейтрофилах, трансфицированных плазмидой, приводила к экспрессии IFN-β [14] . Подобная продукция IFN-β была зарегистрирована для широкого круга патогенов, включая человеческий аденовирус серотипа 5. Агонист TLR4 LPS привел к дополнительной активации транскриптов IFN-β [14] , и несколько исследовательских групп выяснили связь между TLR и производство противовирусных интерферонов. Неясно, можно ли каким-либо образом модулировать ось TLR / IFN типа I таким образом, чтобы получить соответствующий противовирусный иммунный ответ при минимальном повреждении тканей.2. Регулирование передачи сигналов IFN в нейтрофилах
Способность нейтрофилов продуцировать IFN в сочетании с распознаванием вирусных PAMP предполагает, что они имеют решающее значение для врожденной противовирусной защиты хозяина. Используя ряд стимулирующих соединений, исследователи продемонстрировали, что информационные РНК, кодирующие IFN-α, -β и -γ, конститутивно экспрессируются в нейтрофилах [5] . Присутствие IFN типа I снижает концентрацию липида A, агониста TLR4, который необходим для индукции TRIF-зависимых генов, демонстрируя связь между TLR4 и IFN [15] .Нейтрофилы могут использовать распознавание геликазы для активации устойчивого противовирусного ответа [16] . Вирусный миметик двухцепочечной РНК poly (I: C) может распознаваться нейтрофилами, несмотря на то, что они не обладают TLR3. Конститутивная экспрессия MDA5 и RIG-I помогает нейтрофилам распознавать вирусный генетический материал и впоследствии продуцировать IFN типа I, IFN-чувствительные гены (IRG) и иммунорегуляторные цитокины. Эти результаты были подтверждены в экспериментах с использованием вируса энцефаломиокардита на мышах с дефицитом MDA5, у которых наблюдается снижение продукции IFN-β [16] .Зрелые нейтрофилы в основном ответственны за опосредованные нейтрофилами ответы IFN, поскольку незрелые нейтрофилы не экспрессируют IFNAR и имеют более низкие уровни экспрессии IRG [17] . Незрелые нейтрофилы также неспособны эффективно фосфорилировать STAT1 и не праймируются эффективно IFN. Аналогичным образом, исследования регуляции гена незрелых нейтрофилов продемонстрировали ограниченную способность IFN контролировать пролиферацию незрелых нейтрофилов. Хотя IFNs не влияли на незрелые нейтрофилы, IFN-α действительно влияет на их гемопоэтические стволовые клетки-предшественники, активируя спящие клетки [18] .Напротив, зрелые нейтрофилы экспрессируют гены, позволяющие им реагировать на IFN как I, так и II типа [17] . IFN-α активирует зрелые нейтрофилы, позволяя им образовывать внеклеточные ловушки нейтрофилов (NET) для связывания с патогенами (). В петле положительной обратной связи эти ловушки, состоящие в основном из ДНК, белка 1 группового бокса с высокой подвижностью (HMGB1) и антимикробного пептида кателицидина LL37, впоследствии активируют pDC, которые, в свою очередь, производят больше IFN-α за счет связывания ДНК с TLR9. [19] .У мышей с дефицитом интерферона снизилась продукция NETosis и активных форм кислорода (ROS), в то время как обработка рекомбинантным IFN-β восстановила NETosis [20] . Управление этой петлей обратной связи может быть методом, требующим дальнейшего обследования при заболеваниях, которые усугубляются чрезмерным образованием NET. Рисунок 2. Интерферон (IFN) -опосредованная регуляция нейтрофилов при вирусной инфекции хозяина. Вирусные инфекции вызывают множество изменений в биологии нейтрофилов. Экспрессия толл-подобных рецепторов (TLR) увеличивается после воздействия вируса, что приводит к увеличению продукции интерферонов типа I (IFN).Нейтрофилы обладают рецепторами для всех трех подгрупп интерферона. Петля положительной обратной связи возникает во время производства внеклеточных ловушек нейтрофилов (NET). IFNα приводит к продукции NET, которая, в свою очередь, активирует плазматические дендритные клетки (pDC). Связывание дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) из NET с TLR9 продуцирует больше IFNα, что, в свою очередь, может привести к чрезмерной продукции NET. Пути IFN приводят как к провоспалительному ответу, так и к иммунорегуляции. Хотя нейтрофилы являются неотъемлемой частью организма-хозяина для успешного устранения вирусных инфекций, некоторые вирусы адаптировали механизмы для перехвата ответа IFN, чтобы вызвать нежелательное повреждение хозяина, вызванное нейтрофилами.Чрезмерное производство цитокинов может привести к фатальной иммуноопосредованной чрезмерной реакции на вирусную угрозу. Другие сокращения: CXCR2: хемокиновый рецептор 2 CXC, MMP: матриксные металлопротеазы, NAMPT: никотинамидфосфорибозилтрансфераза, ROS: активные формы кислорода. Некоторые вирусы способны инфицировать нейтрофилы. Во время инфекции IAV нейтрофилы инициируют многогранный иммунный ответ. IFN типа I экспрессируются вместе с ISG и повышающей регуляцией PRR [13] . Для этого требуется проникновение вируса, но репликация не обязательна.Вирулентный штамм вируса гриппа h4N2 также инфицирует нейтрофилы и вызывает устойчивую сигнальную и регуляторную реакцию IFN типа I, начиная с трех часов после инфицирования [11] . Легкие, подверженные вирусной инфекции, имеют другую иммунологическую среду по сравнению с бактериальными легочными инфекциями, состоящую из IFN типа I и возникающих из них ISG. Отсюда следует, что нейтрофилы, попадающие в эту обусловленную вирусом микросреду, будут реагировать иначе, чем на бактериальную инфекцию.Вирусы также обладают генами, подавляющими IFN типа I, что способствует их выживанию. IAV экспрессируют неструктурный белок (NS1), который предотвращает индукцию IFN-β [21] . Эксперименты на хорьках с использованием NS1 из вызывающего пандемию штамма IAV с 1918 года показали, что этот белок значительно задерживает ответ IFN типа I [22] . Более того, штамм IAV СССР / 90/77 опосредовал менее выраженную задержку ответа IFN. Дополнительные исследования на хорьках показали, что легкие инфекции гриппа имеют устойчивый врожденный ответ, в то время как тяжелое заболевание связано со снижением ответа IFN типа I и типа II [23] .Генетически измененный вариант IAV с удаленным NS1 восстанавливает ответы IFN-α и IFN-β в сочетании с повышенной активацией NF-κB [24] . Нейтрофилы, инфицированные вирусом гриппа, инициировали адаптивную иммунную систему, переходя в антигенпрезентирующие клетки и впоследствии активируя эффекторные противовирусные CD8 + Т-клетки [25] . Истощение нейтрофилов уменьшило количество вирус-специфичных CD8 + Т-клеток, хотя оно не повлияло на транспорт Т-клеток в контексте инфекции легочного гриппа [26] .IFN типа I неразрывно связаны в большинстве аспектов существования нейтрофилов, опосредуя как продукцию нейтрофилов, так и клеточную регуляцию. Интерфероны типа I регулируют передачу сигналов никотинамидфосфорибозилтрансферазы (NAMPT), которая, в свою очередь, участвует в выживании и созревании нейтрофилов [27] . В частности, IFN подавляют NAMPT, как показано на моделях животных с дефицитом IFN. Дефицит IFN приводит к увеличению NAMPT во время созревания предшественников нейтрофилов в костном мозге.Во время развития NAMPT увеличивает раннюю выживаемость предшественников, а затем замедляет дифференцировку нейтрофилов. На более поздних стадиях жизни, когда зрелые нейтрофилы рекрутируются в инфицированные области, IFN — наряду с G-CSF и TNF — продлевает выживаемость нейтрофилов [4] . Интерферон-α задерживает апоптоз нейтрофилов, индуцируя клеточные ингибиторы апоптоза 2 (cIAP2) через STAT аналогично G-CSF [28] . Синтез cIAP2 зависит от активации киназы Janus 2-STAT3. IFN типа I подавляют G-CSF, который участвует в жизненном цикле нейтрофилов [29] [30] [31] .G-CSF вызывает STAT3-зависимые изменения в костном мозге, влияя на миграцию нейтрофилов [32] . Подавляя ключевые сигналы контроля миграции нейтрофилов, продукция IFN может контролировать величину опосредованных нейтрофилами ответов на вирусные инфекции. Интерферон-β инициирует фосфатидилинозитол-3-киназу-зависимую выживаемость нейтрофилов, таким образом предотвращая апоптоз [33] . В контексте рака IFN-β необходим для максимизации цитотоксичности нейтрофилов [30] .Нейтрофилы могут продуцировать IFN типа II в нескольких условиях. Во время ишемии-реперфузии почек нейтрофилы продуцируют IFN-γ, феномен, который зависит от активации естественных Т-киллеров в почках в течение трех часов после реперфузии [34] . IFN-γ также продуцируется клетками Gr-1 + CD11b + в контексте раннего отторжения трансплантата островков поджелудочной железы, которые снова зависят от клеток NKT [35] . Патогены также способны инициировать ответы IFN-γ нейтрофилами, как это наблюдалось в экспериментах по Streptococcus pneumoniae [36] .Удаление патогенов, опосредованное полученным из нейтрофилов IFN-γ, зависит от никотинамидадениндинуклеотидфосфат (NADPH) оксидазы, Ras-родственного субстрата 2 ботулинического токсина C3 (Rac2) и тирозинкиназ семейства Hck / Lyn / Fgr Src. Производство IFN типа II в нейтрофилах требует производства этих соединений. NET являются предлагаемым механизмом очистки [37] . Подробный анализ показал, что MyD88 также важен для продукции IFN-γ нейтрофилами, хотя TLR и TRIF, по-видимому, не участвуют [36] .Впоследствии нейтрофилы могут реагировать на IFN-γ за счет усиления экспрессии генов и способности окислительного всплеска. Ясно, что традиционное определение нейтрофилов как терминальных фагоцитов было изменено исследованиями, демонстрирующими точно настроенный синтез белка нейтрофилов в ответ на внешние стимулы [38] .Влияние перорального употребления меда на иммунную функцию после стимуляции липополисахаридами Ex-vivo у здоровых людей, энергетическое лечение сознания фолиевой кислотой
Поскольку организм является крупнейшим органом защиты организма-хозяина, жизнеспособность микрофлоры желудочно-кишечного тракта имеет решающее значение для минимизации патофизиологических осложнений. 1 .На функциональность микрофлории в значительной степени влияют различия в микробных сообществах. Эти сообщества формируются рядом сложных и динамичных эпигнетических факторов, включая диету, образ жизни и болезни 2 . Взаимодействия между микробиотой кишечника и иммунной системой хозяина могут модулировать метаболические реакции, примером чего является производство желчных кислот, холина и короткоцепочечных жирных кислот, которые необходимы для здоровья хозяина 2 . Это усиливает связь между статусом питания хозяина, микробиотой / микробиомом и реакционными иммунными реакциями.Понимание этих осей является предпосылкой для оптимизации терапевтических стратегий, которые могут вызвать защитный иммунный ответ. В условиях продолжающегося финансового бремени наших национальных служб здравоохранения и сильной зависимости от фармацевтических препаратов в качестве контрмер для борьбы с болезнями открытие диетических стратегий, нацеленных на профилактику, а не на лечение, заслуживает дальнейшего изучения.
Мед — вязкое и гигроскопичное вещество, производимое пчелами из цветочного нектара.Эта богатая сахаром жидкость имеет решающее значение для экологии растений, эволюции насекомых и биоразнообразия. Исторически мед использовался как естественное лечебное средство, и наглядные свидетельства его использования датируются 8000 лет назад. Традиционно мед считается натуральным лечебным средством из-за его невероятно насыщенного питательного состава 3 . Почти весь «сырой» (т.е. непастеризованный) мед содержит несколько питательных микроэлементов (кальций, железо, магний, фосфор, калий, натрий и цинк), витамины (B2, B3, B5, B6, B9 и C) и ферменты (глюкозооксидаза), которые предположительно способствуют мощному ингибирующему эффекту, который он вызывает до 60 видов бактерий, грибов и вирусов 4 .Хотя мед состоит в основном из фруктозы и глюкозы, он также содержит пребиотический фруктоолигосахарид (ФОС). После ферментации в толстой кишке FOS стимулирует производство бифидобактерий, одного из основных родов бактерий, характеризующих «здоровую» микрофлору.
Неудивительно, что многофункциональные иммуномодулирующие свойства меда привлекли внимание ученых, и исследования показали, что он обладает противомикробным действием 5 , противовоспалительным 6 , антиоксидантом 7 и антимутагенными свойствами 6 , 8 .Особый интерес представляют иммунологические свойства меда, который в зависимости от биогеографического источника может содержать повышенные уровни встречающегося в природе казуаринового глюкозида; соединение, связанное с активным стимулированием более сильной провоспалительной реакции на патогены. Важно отметить, что казуарин глюкозид является вышестоящим регулятором различных плейотропных цитокинов, включая интерферон гамма (IFN-γ), димеризованный растворимый цитокин, который усиливает клеточный иммунитет и активирует естественные клетки-киллеры (NK) для обеспечения противовирусной активности 9 .
С клинической точки зрения, IFN-γ представляет собой важный медиатор нескольких клеточных процессов, которые помогают облегчить различные патологии, например рассеянный склероз 10 , трансплантация органов 11 и ревматоидный артрит 12 . IFN-γ также является важным индикатором активации Т-клеток гиперчувствительности замедленного типа (TDTH), которые высвобождают IFN-γ как ответную реакцию на антигены. Хотя в основном он рассматривается как цитокин, связанный с Т-клетками, IFN-γ также продуцируется другими иммунными клетками 13 .Действительно, комбинированная стимуляция как IFN-γ, так и липополисахаридами (LPS) или только LPS может значительно увеличить процент продуцирующих IFN-γ моноцитов у здоровых людей 13 . ЛПС / эндотоксин является составной частью клеточной стенки грамотрицательных бактерий, которая активирует микробицидные эффекторные функции макрофагов, а также продукцию различных провоспалительных цитокинов. Попадая в кровоток, LPS стимулирует противовоспалительную реакцию острой фазы за счет активации макрофагов, которые пытаются бороться с патогенными инвазиями.
Интересно, что недавняя экспериментальная работа Дэвидсона и Ротондо (2005) наблюдала мощные противовоспалительные эффекты перорального приема 20,4 г (концентрация казуарин глюкозида 1,3 мг) меда из тропических лесов (TFH) в 0, 2, 7, 14 и 21 день. после администрации. Пиковое увеличение IFN-γ было обнаружено на 2 день, то есть через 48 часов после употребления, со значениями, достигающими 4,6, 5,0, 9,7 и 13,0 раз выше, чем исходные уровни (день 0) в ответ на 0 мкг / мл, 0,01 мкг / мл, 1 мкг / мл и 100 мкг / мл липолисахарида (ЛПС) соответственно.
Учитывая, что даже небольшие количества IFN-γ могут повысить способность макрофагов бороться с патогенами 14 , следует отметить повышенные концентрации, наблюдаемые во время этого пилотного исследования. Однако, хотя обычно считается пищей с высоким содержанием питательных веществ, могут существовать существенные меж- и внутренние вариации как в макро-, так и в микронутриентном профиле любого данного меда 15 . Такие различия в значительной степени зависят от вариаций в его сложном химическом составе, который может значительно варьироваться в зависимости от происхождения нектара, вида пчел, географического положения и способа производства.Таким образом, сравнительная работа по изучению потенциальных различий в иммунологических биомаркерах между сортами меда может помочь выявить наиболее подходящие для патофизиологических осложнений.